牛羊布病快速檢測卡采用膠體金免疫層析試驗(yàn)(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標(biāo)記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在布病抗體則與膠體金標(biāo)記物及檢測線上的抗原結(jié)合而顯示紫紅色,若樣本中不存在布病抗體則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
牛羊布病快速檢測卡樣本要求:
1.本檢測卡僅適用于檢測牛羊血清/全血/奶樣。
2.血清:按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置約1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置約2小時,待血液凝固自然析出血清),分離血清。要求血清清亮,無溶血、無污染。血清樣本短期可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
3.全血:采集新鮮抗凝全血當(dāng)天使用,未加抗凝劑的全血現(xiàn)采現(xiàn)用。
4.奶樣:采集新鮮奶樣當(dāng)天使用。
牛羊布病快速檢測卡試驗(yàn)方法:
1.用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本,垂直而緩慢的滴加1滴血清或者2滴全血或者1滴奶樣到樣本稀釋液中(注意:該步驟很關(guān)鍵,樣本切不可多加),混勻后待用。
2.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上,使用袋內(nèi)吸管取2-3滴(約60ul)步驟1得到的待測液到加樣孔內(nèi)。(若有微量移液器,可先加3ul血清或6ul全血,再滴加兩滴稀釋液)。
3.室溫下放置10-15分鐘判斷結(jié)果,15分鐘后結(jié)果只作參考。
結(jié)果判斷
1.陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3.失效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
【試驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.當(dāng)被檢樣本檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),說明被檢測樣本中沒有布病抗體。
2.當(dāng)被檢樣本檢測線(T)處有明顯色帶出現(xiàn),則該樣本中含有布病抗體。